人参皂苷 ＲH2 诱导口腔鳞癌耐药细胞凋亡

       口腔鳞癌在口腔颌面部的恶性肿瘤中占较高比重，常用的临床治疗手段包括手术、化学、放射和靶向治疗等，其中化学治疗是术后最常用的辅助治疗手段，但现有临床药物大多毒副作用较高，且长期使用过程中，细胞耐药性使化疗效果大大减 弱。这种现象是由于P-糖蛋白、耐药性相关蛋白及凋亡抑制基因等表达所引起。据美国癌症协会调查，不同程度的耐药会导90%以上的癌症患者死亡。人参皂苷 Ｒh2在肿瘤治疗方面安全有效，不仅具有促凋亡、抑生长、防转移等能力; 可杀伤胆囊癌、肠癌、胰腺癌等多种肿瘤细胞;且对于乳腺癌、肺癌及肝癌等因化 学药物产生的耐药性发生逆转作用，能够通过诱导凋亡作用于P-糖蛋白介导的耐药现象。

       口腔鳞癌目前仍是威胁人们生命的重大疾病，由于手术极易损伤面部，化疗成为治疗口腔鳞癌最重要的手段，虽然目前常用的临床治疗药物顺铂、5-氟尿嘧啶及紫杉醇等虽有较好的 治疗效果，但毒副作用高和致免疫力低下等可引起许多其他疾病的发生，除此外还极易产生耐药性。KBV细胞是以对顺铂较为敏感的KB细胞通过顺铂浓度梯度刺激后诱导而成，其耐药程度远高于KB 细胞，可作为研究肿瘤细胞耐药性的良好材料。对在研究顺铂耐药的分子机制的过程中发现，顺铂的耐药主要是通过抑制凋亡信号传导和DNA 修复损伤、减少药物累积和增强去活作用等。结果表明，KBV对顺铂耐受良好，而Ｒh2 在作用于KBV细胞的 48 h内，其导致的生长抑制率在实验范围内随着时间与剂量的增加而增加，并且持续作用于KBV的同时，对人体正常细胞伤害极小，证实Ｒh2是一种安全低毒且在体外对KBV有良好抑制作用的药物。

       细胞凋亡是在基因控制下自主死亡并可稳定内环境的有序过程，不发生炎症反应，过程中细胞膜保持完整，并在核酸酶作用下发生DNA 降解，因此会发生台盼蓝拒染现象和产生200 bp左右整倍数核苷酸片段。本研究中，结合 MTT法与台盼蓝染色，发现MTT法得到的生长抑制率要远高于台盼蓝染色得到的死亡率，证实Ｒh2导致 KBV 细胞的主要死亡方式在于凋亡，并通过提取药物作用于 KBV 细胞的基因组进行 DNA电泳所形成的特异性梯状条带，发现KBV从12 h开始出现凋亡， 并且随着药物浓度的上升，DNA 降解越完全。

来源：中国老年学杂志2017年8月第37卷 

作者：徐亚娟 金志巍 刘莉莉 刘文书