HPLC 法测定人参毛状根及不同人参样品中 9 种人参皂苷的含量

       人参（Panax ginseng Ｃ.Ａ.Ｍｅｙ.）是五加科人参属植物，其干燥根和根茎同名入药，始载于《神农本草经》，列为上品，是我国常用传统中药。人参味甘、微苦，性微温，归肺、脾、心、肾经，具有大补元气，补脾益肺，生津止渴，安神益智等功效。现代临床主要用于治疗心气虚证、冠心病、心律失常等疾病，是应用最广泛、研究最深入的中药之一，主要分布在我国辽宁省东部、吉林省东半部和黑龙江省东部。

       现代研究表明，人参含有人参皂苷、氨基酸及挥发油等成分，对中枢神经系统、心血管系统、消化系统、免疫系统、内分泌系统及泌尿生殖系统有广泛的作用，能增强机体对有害刺激的抵抗力。人参的有效成分主要是人参皂苷，可分为三类：五环三萜类的齐墩果烷型皂苷——人参皂苷 Ｒｏ ；原人参二醇型的四环三萜类达玛烷型皂苷——人参皂苷 Ｒｈ２、Ｒｇ３、Ｒｂ１、Ｒｂ、Ｒｃ ；原人参三醇型的四环三萜类达玛烷型皂苷——人参皂苷 Ｒｅ、Ｒｆ、Ｒｇ１。毛状根技术是20世纪80年代后期发展起来的一项新兴的生物技术 。

       发根农杆菌 A grobacterium rhizogenes 的质粒在感染植物细胞时，其所含的 Ｔ-ＤＮＡ 能稳定地整合到植物细胞基因组中并诱导产生大量毛状根，利用这种发根农杆菌的生物技术来侵染宿主人参 P.ginseng Ｃ.Ａ.Ｍｅｙ.，并使其产生转基因的人参毛状根，此项技术所转化的人参毛状根具有生长周期短 、遗传性状稳定和激素自养等特点，在人参次生代谢的研究中是较为理想的组织培养物。因此，利用人参毛状根技术为人参及其人参皂苷、人参多糖等次生代谢物的生产开辟了新的途径。

       实验结果表明，人参毛状根中的人参皂苷 Ｒｈ２含量高于其他样品，其各皂苷含量不低于药材饮片，有些甚至高于主根。由此可知，人参毛状根不仅生长迅速、遗传稳定、培养方便，其皂苷类成分也相对较高，是一种高效的培养体系。本研究首次运用ＨＰＬＣ法测定人参毛状根中9种人参皂苷的含量，进一步建立基于人参毛状根平台研究人参与环境关系的技术体系，也为利用毛状根技术工业化生产人参次生代谢产物提供科学依据。《药典》规定，人参药材按干燥品计算，含人参皂苷 Ｒｇ１ 和人参皂苷 Ｒｅ的总量不得少于0.30％，人参皂苷 Ｒｂ１ 不得少于0.20％，人参饮片含人参皂苷 Ｒｇ１和人参皂苷 Ｒｅ 的总量不得少于0.27％，人参皂苷 Ｒｂ１ 不得少于0.18％，本研究测试的人参主根、须根、茎、叶、果和人参毛状根均符合药材标准，人参饮片也符合《药典》中的饮片标准。

       本研究首次进行原植物人参、人参毛状根和人参饮片的9种人参皂苷比较，建立了高效、可靠、精准的 ＨＰＬＣ 测定方法，可用于各类人参样品中9种皂苷成分的测定。从研究结果来看，人参药材和人参饮片的皂苷成分符合《药典》标准。原植物人参须根和叶可进一步加强利用，人参果中的 Ｒｅ 和人参毛状根中的 Ｒｈ２也可用于单成分的提取利用。人参毛状根的皂苷成分高，培养方便、生长迅速，可作为理想的实验平台，为研究环境对人参的影响提供参考。

来源：药学实践杂志 ２０１６ 年 ７ 月 ２５ 日第 ３４ 卷第 ４ 期